什么是凝膠滲透色譜柱

更新時間：2023-12-11 點擊次數(shù)：3308

凝膠滲透色譜(Gel Filtration Chromatography)是一種基于凝膠顆粒孔徑大小的分離技術(shù)，也稱為分子排斥色譜(Size Exclusion Chromatography)。凝膠滲透色譜柱是用于進行此類分離的專門色譜柱。

凝膠滲透色譜柱是由一種或多種高分子材料制成的，如微球、基質(zhì)顆粒等。這些高分子材料通常是交聯(lián)的，并具有孔徑分布的大小。這些孔徑大小可以根據(jù)材料的制造方式進行調(diào)整。

樣品在進入凝膠滲透色譜柱時，會與凝膠顆粒相互作用，樣品大分子會被藍色顆粒的微孔所隔離，無法進入顆粒內(nèi)部，因此進一步阻止了大分子向內(nèi)層移動的能力。而較小的分子則可以進入顆粒的內(nèi)部，因此會相對快速地通過凝膠顆粒。這樣，不同分子大小的樣品可以在凝膠滲透色譜柱中分離出來。

凝膠滲透色譜柱的分離能力基于分子量分布的性質(zhì)，因此特別適用于高分子化學和生物化學的分離和純化。例如，它常用于分離和純化蛋白質(zhì)、DNA、RNA、糖類和多肽等高分子物質(zhì)。其分離過程不依賴于分子的化學性質(zhì)，可以分離富含分子的混合物，同時還可以用于精確分子量的確定。

需要注意的是，選擇適合的凝膠滲透色譜柱時，應(yīng)根據(jù)待分離物質(zhì)的分子量范圍選擇適當?shù)目讖酱笮　Ｈ绻讖竭^小，則不能分離大分子，如果孔徑過大，則不能分離小分子。

TPChrom Beads凝膠滲透色譜填料的優(yōu)勢：
高度的粒徑均一性，球形，反壓低，洗脫體積小分離度大，分辨率高，裝柱容易，線性流速大。

產(chǎn)品名稱	粒徑大小um	基質(zhì)	交聯(lián)度%	主要特點	分子排阻極限, Da
TPChrom Beads X1	42	PS/DVB	1	溶脹能力強，較軟，耐壓低適用于中低壓制備色譜溶脹能力弱，較硬，耐壓高適用于中高壓制備色譜	14000
TPChrom Beads X3			3		1000-2000
TPChrom Beads X8			8		400-1000
TPChrom Beads X12			12		≤400

凝膠滲透色譜柱適用于有機溶劑體系半微量的高性能的SEC分析柱。由粒徑均一，但每個填料上分布大小不同的孔，即由細孔多分散型均一粒徑的填料裝填而成。從而實現(xiàn)了校正曲線的優(yōu)異的線形相關(guān)關(guān)系。

使用細孔多分散型分析柱獲得的校正曲線沒有變曲點。因而色譜圖中的測定峰形不會出現(xiàn)不規(guī)則的凹凸現(xiàn)象可提供適用于分子量分布范圍不同的三種規(guī)格分析柱。

GPC凝膠滲透色譜柱

凝膠滲透色譜柱的結(jié)構(gòu)及主要功能：

由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲(封頭)與柱填料等組成。

（1）柱管：多用不銹鋼制成，若果使用時柱壓不高于70kg/cm2時，也可采用厚壁玻璃或石英管，管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。用于柱填料的裝填。

（2）壓帽：即色譜柱兩端套合于柱管端外壁的塑性圓柱帽，中部有小孔，多為聚四氟乙烯制成，用于固定篩板。

（3）密封環(huán)：位于接頭螺旋環(huán)內(nèi)壁的彈性環(huán)，多為聚四氟乙烯制成，用于色譜柱兩端壓帽與柱外壁的密封。

（4）篩板：位于色譜柱兩端緊貼柱管端的篩網(wǎng)狀薄片，由燒結(jié)不銹鋼或鈦合金制成，孔徑取決于填料粒度，一般為0.2~20&um。用于防止填料從柱管內(nèi)漏出。
（5）接頭：柱兩端連接流動相與柱管的中空環(huán)套，由不銹鋼制成。用于柱管路聯(lián)通與柱端高壓固定。

（6）封頭：柱兩端的密封螺絲，用于保存色譜柱時封頭。

（7）柱填料：裝填于柱管內(nèi)的固定相擔體，其直接決定了色譜柱的類型與用途，是色譜柱的核心。多為無定形或球形硅膠基質(zhì)，也有環(huán)糊精、活性炭、聚苯乙烯-二乙烯基苯、聚甲基丙酸酯、氧化鋁等基質(zhì)。用于色譜分離。

凝膠滲透色譜柱是一種強大的高分子分離和純化工具，可廣泛應(yīng)用于化學和生物學領(lǐng)域。

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